1211胰島素生物測定法

本法系比較胰島素標準品(S)與供試品(T)引起小鼠血糖下降的作用，以測定供試品的效價。標準品溶液的制備 精密稱取胰島素標準品適量,按標示效價，加入每100m|中含有苯酚0.2g并用鹽酸調節(jié)pH值為2.5的0.9%氨化鈉溶液，使溶解成每1ml中含20單位的溶液，4~8C貯存，以不超過5天為宜。

標準品稀釋液的制備 試驗當日,精密量取標準品溶液適量,按高低劑量組((2、(1)加0.9%氣化鈉溶液(pH2.5)制成兩種濃度的稀釋液，高低劑量的比值(r)不得大于1:0.5。高濃度梯釋液一般可制成每1m|中含0.06~0.12單位,調節(jié)劑量使低劑量能引起血糖明顯下降,高劑量不致引起血糖過度降低，高低劑量間引起的血糖下降有明顯差別。

供試品溶液與稀釋液的制備 按供試品的標示量或估計效價(A-)，照標準品溶液與其稀釋液的制備法制成高、低兩種濃度的稀釋液，其比值(r)應與標準品相等，供試品與標準品高低劑量所致的反應平均值應相近。

測定法 取健康合格、同一來源、同一性別、出生日期相近的成年小鼠,體重相差不得超過3g,按體重隨機等分成4組,每組不少于10只,逐只編號，各組小鼠分別自皮下注入一種濃度的標準品或供試品稀釋液,每鼠0.2~0.3m|,但各鼠的注射體積(m)應相等。注射后40分鐘，按給藥順序分別自眼靜脈從采血，用適宜的方法,如葡萄糖氧化酶-過氧化酶法測定血糖值。第一次給藥后間隔至少3小時，按雙交又設計，對每組的各鼠進行第次給藥，并測定給藥后40分鐘的血糖值。照生物檢定統(tǒng)計法(通則1431)中量反應平行線測定雙交叉設計法計算效價及實驗誤差。

本法的可信限率(FL%)不得大于25%。

來源：藥典委